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細胞培養(yǎng)是一項需要嚴格無菌操作的實驗技術(shù),以下是關(guān)于細胞培養(yǎng)的無菌操作基本技術(shù)、實驗用品、培養(yǎng)基、抗生素和血清等方面的總結(jié)。一、無菌操作基本技術(shù)1.實驗前準備:-無菌室及無菌操作臺以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,用70%乙醇擦拭無菌操作臺面,并開啟無菌操作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)10分鐘后開始實驗操作。-每次操作只處理一株細胞株,不共享培養(yǎng)基,避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,用70%乙醇擦拭無菌操作臺面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺運轉(zhuǎn)10分鐘以上,再進行下一個細胞株操作。2.操作區(qū)域要求...
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LTS吸頭和UNV吸頭存在多方面的區(qū)別,具體如下:1.設(shè)計與適配性:-LTS吸頭:LTS指的是LiteTouchTipEjection移液系統(tǒng),這種吸頭是專門為Rainin的LTS移液器設(shè)計的。LTS移液器采用圓柱型套柄,LTS吸頭與這種套柄的匹配度非常高,裝吸頭時較為輕松,且具有良好的氣密性。這種設(shè)計有助于降低實驗室重復(fù)性勞損的風(fēng)險。-UNV吸頭:屬于通用型吸頭,可以適配Rainin的通用型移液器(圓椎型套柄),也能適配其他大多數(shù)品牌的通用型移液器。其兼容性較強,但與特定移...
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重組蛋白的復(fù)性是一個復(fù)雜的過程,以下是一些常見的復(fù)性方法:一、稀釋復(fù)性法1.原理:將變性的重組蛋白緩慢加入到復(fù)性緩沖液中,降低蛋白濃度,從而減少分子間的相互作用,促進正確折疊。2.操作步驟:-準備合適的復(fù)性緩沖液,通常包含一定濃度的鹽、緩沖劑、氧化還原對(如谷胱甘肽)等。-將變性的蛋白溶液以緩慢的速度滴加到復(fù)性緩沖液中,同時輕輕攪拌。-在特定的溫度下(通常為4℃或室溫)進行一段時間的孵育,讓蛋白逐步復(fù)性。3.優(yōu)點:操作相對簡單,成本較低。4.缺點:需要較大體積的復(fù)性緩沖液,可...
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生物反應(yīng)器培養(yǎng)細胞的方法主要包括分批式操作、流加式操作、半連續(xù)式操作、連續(xù)式操作和灌流式操作。以下是對這些方法的具體介紹:分批式操作定義與特點:分批式操作是細胞規(guī)模培養(yǎng)中較早期采用的方式,也是其他操作方式的基礎(chǔ)。該方式采用機械攪拌式生物反應(yīng)器,將細胞擴大培養(yǎng)后一次性轉(zhuǎn)入生物反應(yīng)器內(nèi)進行培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中,其體積不變,不添加其他成分,待細胞增長和產(chǎn)物形成積累到適當(dāng)?shù)臅r間后,一次性收獲細胞、產(chǎn)物和培養(yǎng)基。優(yōu)點:操作簡單,培養(yǎng)周期短,染菌和細胞突變的風(fēng)險小。反應(yīng)器系統(tǒng)屬于封閉式,培...
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聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)作為一種強大的分子生物學(xué)技術(shù),在生命科學(xué)研究、醫(yī)學(xué)研究、法醫(yī)學(xué)等眾多領(lǐng)域都發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。深入了解PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件,對于準確、高效地進行實驗非常重要。一、標準的PCR反應(yīng)體系標準的PCR反應(yīng)體系包含多個關(guān)鍵成分。主要有:10×擴增緩沖液,它為反應(yīng)提供穩(wěn)定的化學(xué)環(huán)境。4種dNTP混合物,即脫氧核糖核苷三磷酸(包括dATP、dCTP、dGTP、dTTP),各以200umol/L的濃度存在于體系中,為DNA合成提供原料。引物是PCR特異性反應(yīng)的...
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